Lady Macbeth: Moglie e co-cospiratrice di Macbeth. È una donna spietata e ambiziosa che spinge Macbeth a uccidere il re Duncan. Dopo l'omicidio, Lady Macbeth è tormentata dal senso di colpa e dal rimorso e alla fine muore in uno stato di follia.
Re Duncan: Il re di Scozia all'inizio dello spettacolo. È un sovrano gentile e benevolo e il suo omicidio da parte di Macbeth mette in moto i tragici eventi della storia.
Banco: Un collega generale e amico intimo di Macbeth. Sospetta il coinvolgimento di Macbeth nell'omicidio di re Duncan e alla fine diventa vittima della paranoia di Macbeth.
Le tre streghe: Tre figure soprannaturali che profetizzano che Macbeth diventerà re. Le loro profezie mettono in moto gli eventi dell'opera e sono usate come simbolo del destino e delle conseguenze dell'ambizione.
Macduff: Un nobile scozzese che si oppone al governo di Macbeth e alla fine guida le forze che lo rovesciano.
Malcolm e Donalbain: I figli di re Duncan. Malcolm fugge in Inghilterra dopo l'omicidio di suo padre e alla fine torna in Scozia per guidare un esercito contro Macbeth. Anche Donalbain fugge dalla Scozia dopo l'omicidio, ma non ha un ruolo significativo nel resto dell'opera.
Ecate: La dea della stregoneria e della magia. Appare nell'Atto III dell'opera e ordina alle streghe di eseguire i suoi ordini.