Nella commedia Macbeth, Lady Macbeth gioca un ruolo cruciale nella morte del re Duncan. È lei che convince Macbeth ad uccidere il re e lo aiuta a pianificare e portare a termine l'atto.
Dopo che Macbeth ha espresso i suoi dubbi e le sue paure sull'uccisione del re, Lady Macbeth lo rimprovera di essere un codardo e lo costringe a commettere il crimine. Lei sottolinea che ha già avuto l'idea di uccidere Duncan e che sta solo esitando a causa della sua "natura debole". Gli ricorda anche la sua ambizione di diventare re e gli dice che deve essere spietato se vuole raggiungere i suoi obiettivi.
La determinazione e la manipolazione di Lady Macbeth alla fine convincono Macbeth ad accettare il suo piano. Espone i dettagli dell'omicidio, incluso come e quando dovrebbe essere commesso. Dice anche a Macbeth di lasciare i pugnali insanguinati accanto al corpo di Duncan in modo che la colpa ricada sulle guardie del re.
Dopo che l'omicidio è stato commesso, Lady Macbeth è inizialmente fiduciosa di riuscire a insabbiarlo. Tuttavia, presto inizia a mostrare segni di senso di colpa e di follia. Diventa ossessionata dal sangue sulle sue mani e non riesce a dormire. Comincia anche ad avere visioni del fantasma di Duncan, che la accusa di omicidio.
Il senso di colpa di Lady Macbeth alla fine diventa troppo da sopportare per lei. Muore nel quarto atto dell'opera e la sua morte rappresenta un punto di svolta per Macbeth. Diventa ancora più spietato e tirannico e alla fine perde la testa.
Il ruolo di Lady Macbeth nella morte di re Duncan è significativo perché mette in luce il potere dell'ambizione e i pericoli che si corrono nel permettere ai propri desideri di superare i propri principi morali. È un personaggio complesso e tragico che alla fine viene distrutto dalla sua stessa ambizione e senso di colpa.